Tappa medio impegnativa. Si inizia pedalando lungo le strade della Val di Chiana, risalendo la vallata sopra Castiglion Fiorentino è possibile ammirare località e borghi come Cortona, Montepulciano e Monte San Savino, successivamente si costeggia una vallata dalla quale si potrà ammirare Arezzo e la sua cattedrale. Una distesa di colline ricoperte di ulivi ci accompagna sulla strada denominata "7 ponti", luogo di allenamento del ciclista Gino Bartali, famoso per gli epici duelli con Fausto Coppi sulle strade del Giro Italia e del Tour France. Si supera il borgo Ponte Buriano famoso per il suo magnifico ponte “Paesaggio destro dipinto alle spalle di Monna Lisa il famoso quadro della Gioconda di Leonardo da Vic , dove il fiume Arno forma un lago, quindi pedalando lungo una strada in leggera risalita si arriva a Matassino, posto di controllo e termine della tappa.